Blod-hjärnbarriären, BBB, formas av endotelceller som sammanfogas tätt av tight junction-proteiner. Dessa begränsar transport av substanser mellan cel-lerna in till hjärnan. I BBB pumpas även vissa substanser ut från, eller in till, hjärnan med hjälp av transportproteiner, så kallade aktiva transportörer. Man vet inte riktigt när tight junctions och de aktiva transportörerna utvecklas och hur det påverkar fördelningen av kroppsegna substanser och läkemedel till hjärnan.
I våra gener finns all genetisk kod. Genom avkodning skapas en mRNA-molekyl som vid avläsning, bildar ett protein. Detta protein flyttas sedan till den plats där det har sin funktion. För en aktiv transportör kan det t.ex. vara i cellmembranet.
Endast fritt läkemedel, d.v.s. sådant som inte är bundet till plasmaprotei-ner, kan transporteras genom ett membran samt utöva en effekt i kroppen. Genom att mäta den obundna koncentrationen av ett läkemedel i både hjärna och blod kan man dra slutsatser om vilka mekanismer som styr fördelningen över BBB. Vid mikrodialys opererar man in en så kallad prob, i de vävnader som man är intresserad av, i t.ex. hjärna eller blod. Ett vätskeflöde pumpas genom proben och ett membran tillåter obunden substans i vävnaden att passera in i proben. Med jämna tidsintervall samlar man den utgående väts-kan och väts-kan därmed få koncentrationsbestämningar vid olika tidpunkter. Beroende på flödet genom proben tillåts endast en andel, en fraktion, av den fria koncentrationen i vävnaden att passera membranet i mikrodialysproben. Därför måste denna andel beräknas och tas i beaktan för att få den riktiga vävnadskoncentrationen. Denna fraktion kallas recovery.
Mikrodialysprover innehåller en hög koncentration av salt som försvagar signalen vid kemisk detektion. Därför utvecklades en analysmetod (Aartikel
I) som tar bort salt före detektionen. Den användes sedan för
koncentrations-bestämning av morfin och dess metaboliter, M3G och M6G, i senare arbe-ten.
tionen vara låg, så att eventuella mättnadsbara processer eller ett farmakolo-giskt svar uteblir.
Till skillnad från möss, råttor, grisar och människor, visades att morfin tas upp aktivt till hjärnan hos får (Artikel III). Det kan bero på att får saknar en aktiv transportör som finns hos andra arter och som hos dessa bidrar till aktiv uttransport av morfin från hjärnan. Upptaget minskade från prematura lamm till vuxna får vilket kan bero på minskad upptagsfunktion eller ökad kapaci-tet av uttransport för morfin med stigande ålder. Detta tyder på utvecklings-förändringar, och är relevant även för andra arter.
Nivåer för mRNA mättes vid olika åldrar i BBB hos råttor (Artikel IV). Uttrycket av P-glykoprotein, en aktiv transportör i BBB, och occludin, ett tight junction-protein, förändrades inte med ålder. Däremot sjönk uttycket av den aktiva transportören breast cancer resistance protein, Bcrp, till en sjun-dedel från dag 1 efter födsel till dag 15. Det är sannolikt att detta även på-verkar mängden Bcrp-protein i cellmembranet och därmed fördelningen av Bcrp-transporterade substanser till hjärnan vid olika åldrar.
Bcrps roll i BBB undersöktes genom att mäta hur nitrofurantoin, NTF, som transporteras av Bcrp, fördelas till hjärnvävnad vid olika åldrar (Artikel
V). Ingen skillnad sågs, något vi inte hade förväntat oss utifrån försöket där
mRNA-nivåerna mättes. Mikrodialys visade att den obunda koncentrationen av NTF var mycket låg i hjärnan i förhållande till blod. Detta kan bero på att NTF transporteras av andra transportörer och/eller att substansen metabolise-ras i hjärnan. Fler studier måste genomfömetabolise-ras för att särskilja dessa processer. Vi har också visat, genom att använda genmodifierade möss, där den aktiva tranportören saknas, att Bcrp inte spelar någon väsentlig roll för distribution av NTF över BBB.
Acknowledgements
Avhandlingsarbetet har utförts vid Avdelningen för Farmakokinetik och Läkemedelsterapi, Institutionen för Farmaceutisk Biovetenskap, Uppsala Universitet, Sverige.
Jag vill tacka alla som bidragit med idéer, arbetskraft och glada tillrop under de senaste åren. Däribland särskillt;
Mina handledare:
Margareta, för att du antog mig som doktorand. Jag är tacksam för all kunskap du förmedlat, ditt engagemang i projektet och att du alltid varit ett bra stöd och trott på mig när det behövts. Jag har även uppskattat den raka och ärliga kommunikation vi haft under åren.
Ann-Cathrin, för ditt engagemang med in vitro-arbetet. Det behövdes nå-gon från ”den sidan” för att ro detta i land. Du har varit entusiasmerande och stöttande.
Sven, för alla bra och intressanta diskusioner. Jag har uppskattat väldigt mycket att vi jobbat ihop även med undervisning. Det har ofta varit en väl-behövd andhämtning i allt skrivande och läsande.
Mina medförfattare; Britt Jansson, Emma Boström, Per Ederoth, David Ley, Stefan Hansson, Isis Amer-Wåhlin, Lena Hellström-Westas, Karel Marsál, Carl-Henrik Nordstöm, Kim Kultima och Måns Jergil.
Tack till alla i Lundgänget. Det var väldigt lärorikt att arbeta på, och få in-blick i, den klinisk sidan.
Tack till Britt och Jessica för att ni stått ut med alla försök och analyser. Det har varit ovärdeligt att ha er hjälp på lab under alla dessa år.
Gamla och nuvarande doktorander i Margaretas grupp; Annika, Anubha, Emma, Karin, Markus, Poppi, Stina, Ulrika och Waqas.
Tidiga lunch-gänget (Angelica, Annika, Bettan, Emma B, Emma H, Jocke, Karin, Klas, Marina, Mia, Åsa m.fl); för det alltid funnits sällskap om (när) man är hungrig kl 1120.
Mia Lönnkvist; för dagarna har alltid lyft då vi haft kontakt. Vid tråkiga stunder tar jag fortfarande fram ett av dina gamla mail och läser om något tokigt du hittat på.
Mackan alias "El-Maco" och "the brain slicer"; för att vi haft så roligt på våra konferenser.
Andy; några av mina bästa (tuffaste?) träningsrundor har jag haft tillsam-mans med dig.
Jowan, min gode vän och kamrat; för att du alltid kommer med glada till-rop och har tid att prata.
Rulle; för att du alltid lättade upp stämningen, och var ett glatt tillskott då du var knuten till avdelningen.
Avdelningen för Toxikologi, mitt andra hem. Tack till Lena, Raili och alla doktorander för all hjälp på lab och trevliga pratstunder. Det var en lärorik och trevlig tid hos er.
Alla föräldralediga (Arnaud, Micke, Niklas, Pelle, Skökan och Theres); för allt hängande i parken och på öppna förskolan som fick mig att inse vad som faktiskt är viktigt i livet.
Björn Sandberg. För 12 år sedan spelade vi massor med trumpetduetter. Nu lyfter vi massor med skrot. Jag vet inte vad vi gör år 2021, men hoppas att vi fofarande kommer att träffas och ha skoj!
Aili Palmgren; för ditt stöd i avhandlingens slutskede.
Keith Jarrett; in your music I’ve found both questions and answers. Föräldrar och syskon.
Karin; för att du är världen bästa barnvakt.
Ingrid & Svante. Det är ni som (bokstavligen) får mig att gå upp på morgo-nen, och det är fantastiskt att ha er i tankarna innan jag somnar. Ni ger mig oerhört mycket energi och kärlek och gör livet lätt att leva.
Bettan. Vi har hunit med mycket under de år vi varit tillsammans. Jag hop-pas att du vill vara vid min sida, dag som natt, en lång tid framåt, för vi har mycket kvar att uppleva. Jag kan skriva en lista... Tack för att du finns hos mig och all min kärlek till dig, min pussis!
References
[1] Furuse, M., Sasaki, H. and Tsukita, S. Manner of interaction of het-erogeneous claudin species within and between tight junction strands. J Cell Biol 1999, 147(4), p. 891-903.
[2] Martin-Padura, I., Lostaglio, S., Schneemann, M., Williams, L., Romano, M., Fruscella, P., Panzeri, C., Stoppacciaro, A., Ruco, L., Villa, A., et al. Junctional adhesion molecule, a novel member of the immunoglobulin superfamily that distributes at intercellular junc-tions and modulates monocyte transmigration. J Cell Biol 1998, 142(1), p. 117-27.
[3] McCaffrey, G., Staatz, W.D., Quigley, C.A., Nametz, N., Seelbach, M.J., Campos, C.R., Brooks, T.A., Egleton, R.D. and Davis, T.P. Tight junctions contain oligomeric protein assembly critical for maintaining blood-brain barrier integrity in vivo. J Neurochem 2007, 103, p. 2540-55.
[4] Fanning, A.S., Jameson, B.J., Jesaitis, L.A. and Anderson, J.M. The tight junction protein ZO-1 establishes a link between the trans-membrane protein occludin and the actin cytoskeleton. J Biol Chem 1998, 273(45), p. 29745-53.
[5] Tanaka, Y., Abe, Y., Tsugu, A., Takamiya, Y., Akatsuka, A., Tsu-ruo, T., Yamazaki, H., Ueyama, Y., Sato, O., Tamaoki, N., et al. Ul-trastructural localization of P-glycoprotein on capillary endothelial cells in human gliomas. Virchows Arch 1994, 425(2), p. 133-8. [6] Sugawara, I., Hamada, H., Tsuruo, T. and Mori, S. Specialized
lo-calization of P-glycoprotein recognized by MRK 16 monoclonal an-tibody in endothelial cells of the brain and the spinal cord. Jpn J
Cancer Res 1990, 81(8), p. 727-30.
[7] Eisenblatter, T., Huwel, S. and Galla, H.J. Characterisation of the brain multidrug resistance protein (BMDP/ABCG2/BCRP) ex-pressed at the blood-brain barrier. Brain Res 2003, 971(2), p. 221-31.
[8] Cooray, H.C., Blackmore, C.G., Maskell, L. and Barrand, M.A. Lo-calisation of breast cancer resistance protein in microvessel endothe-lium of human brain. Neuroreport 2002, 13(16), p. 2059-63.
sels studied by confocal microscopy. Mol Pharmacol 2000, 58(6), p. 1357-67.
[11] Zhang, Y., Schuetz, J.D., Elmquist, W.F. and Miller, D.W. Plasma membrane localization of multidrug resistance-associated protein homologs in brain capillary endothelial cells. J Pharmacol Exp Ther 2004, 311(2), p. 449-55.
[12] Kusuhara, H. and Sugiyama, Y. Active Efflux across the Blood-Brain Barrier: Role of the Solute Carrier Family. Neurorx 2005, 2, p. 73-85.
[13] Gao, B., Hagenbuch, B., Kullak-Ublick, G.A., Benke, D., Aguzzi, A. and Meier, P.J. Organic anion-transporting polypeptides mediate transport of opioid peptides across blood-brain barrier. J Pharmacol
Exp Ther 2000, 294(1), p. 73-9.
[14] Mori, S., Takanaga, H., Ohtsuki, S., Deguchi, T., Kang, Y.S., Ho-soya, K. and Terasaki, T. Rat organic anion transporter 3 (rOAT3) is responsible for brain-to-blood efflux of homovanillic acid at the abluminal membrane of brain capillary endothelial cells. J Cereb
Blood Flow Metab 2003, 23(4), p. 432-40.
[15] Kusuhara, H., Sekine, T., Utsunomiya-Tate, N., Tsuda, M., Kojima, R., Cha, S.H., Sugiyama, Y., Kanai, Y. and Endou, H. Molecular cloning and characterization of a new multispecific organic anion transporter from rat brain. J Biol Chem 1999, 274(19), p. 13675-80. [16] Kikuchi, R., Kusuhara, H., Sugiyama, D. and Sugiyama, Y.
Contri-bution of organic anion transporter 3 (Slc22a8) to the elimination of p-aminohippuric acid and benzylpenicillin across the blood-brain barrier. J Pharmacol Exp Ther 2003, 306(1), p. 51-8.
[17] Mori, S., Ohtsuki, S., Takanaga, H., Kikkawa, T., Kang, Y.S. and Terasaki, T. Organic anion transporter 3 is involved in the brain-to-blood efflux transport of thiopurine nucleobase analogs. J
Neuro-chem 2004, 90(4), p. 931-41.
[18] Lagas, J.S., Vlaming, M.L. and Schinkel, A.H. Pharmacokinetic assessment of multiple ATP-binding cassette transporters: the power of combination knockout mice. Mol Interv 2009, 9(3), p. 136-45. [19] Vlaming, M.L., Pala, Z., van Esch, A., Wagenaar, E., de Waart,
D.R., van de Wetering, K., van der Kruijssen, C.M., Oude Elferink, R.P., van Tellingen, O. and Schinkel, A.H. Functionally overlapping roles of Abcg2 (Bcrp1) and Abcc2 (Mrp2) in the elimination of methotrexate and its main toxic metabolite 7-hydroxymethotrexate in vivo. Clin Cancer Res 2009, 15(9), p. 3084-93.
[20] Donner, M.G. and Keppler, D. Up-regulation of basolateral mul-tidrug resistance protein 3 (Mrp3) in cholestatic rat liver.
Hepatol-ogy 2001, 34(2), p. 351-9.
[21] Dobbing, J. and Sands, J. Comparative aspects of the brain growth spurt. Early Hum Dev 1979, 3(1), p. 79-83.
[22] Nehlig, A. Cerebral energy metabolism, glucose transport and blood flow: changes with maturation and adaptation to hypoglycaemia.
[23] Ferguson, R.K. and Woodbury, D.M. Penetration of 14C-inulin and 14C-sucrose into brain, cerebrospinal fluid, and skeletal muscle of developing rats. Exp Brain Res 1969, 7(3), p. 181-94.
[24] Keep, R.F., Ennis, S.R., Beer, M.E. and Betz, A.L. Developmental changes in blood-brain barrier potassium permeability in the rat: re-lation to brain growth. J Physiol 1995, 488 (Pt 2), p. 439-48.
[25] Stewart, P.A. and Hayakawa, E.M. Interendothelial junctional changes underlie the developmental 'tightening' of the blood-brain barrier. Brain Res 1987, 429(2), p. 271-81.
[26] Dziegielewska, K.M., Evans, C.A., Malinowska, D.H., Mollgard, K., Reynolds, J.M., Reynolds, M.L. and Saunders, N.R. Studies of the development of brain barrier systems to lipid insoluble mole-cules in fetal sheep. J Physiol 1979, 292, p. 207-31.
[27] Ek, C.J., Habgood, M.D., Dziegielewska, K.M., Potter, A. and Saunders, N.R. Permeability and route of entry for lipid-insoluble molecules across brain barriers in developing Monodelphis domes-tica. J Physiol 2001, 536(Pt 3), p. 841-53.
[28] Evans, C.A., Reynolds, J.M., Reynolds, M.L., Saunders, N.R. and Segal, M.B. The development of a blood-brain barrier mechanism in foetal sheep. J Physiol 1974, 238(2), p. 371-86.
[29] Stonestreet, B.S., Patlak, C.S., Pettigrew, K.D., Reilly, C.B. and Cserr, H.F. Ontogeny of blood-brain barrier function in ovine fe-tuses, lambs, and adults. Am J Physiol 1996, 271(6 Pt 2), p. R1594-601.
[30] Tuor, U.I., Simone, C. and Bascaramurty, S. Local blood-brain bar-rier in the newborn rabbit: postnatal changes in alpha-aminoisobutyric acid transfer within medulla, cortex, and selected brain areas. J Neurochem 1992, 59(3), p. 999-1007.
[31] Groenendaal, D., Freijer, J., de Mik, D., Bouw, M.R., Danhof, M. and de Lange, E.C. Population pharmacokinetic modelling of non-linear brain distribution of morphine: influence of active saturable influx and P-glycoprotein mediated efflux. Br J Pharmacol 2007, 151(5), p. 701-12.
[32] Letrent, S.P., Pollack, G.M., Brouwer, K.R. and Brouwer, K.L. Ef-fects of a potent and specific P-glycoprotein inhibitor on the blood-brain barrier distribution and antinociceptive effect of morphine in the rat. Drug Metab Dispos 1999, 27(7), p. 827-34.
[33] Xie, R., Hammarlund-Udenaes, M., de Boer, A.G. and de Lange, E.C. The role of P-glycoprotein in blood-brain barrier transport of morphine: transcortical microdialysis studies in mdr1a (-/-) and mdr1a (+/+) mice. Br J Pharmacol 1999, 128(3), p. 563-8.
[36] Bengtsson, J., Bostrom, E. and Hammarlund-Udenaes, M. The use of a deuterated calibrator for in vivo recovery estimations in mi-crodialysis studies. J Pharm Sci 2008, 97(8), p. 3433-41.
[37] Tunblad, K., Ederoth, P., Gardenfors, A., Hammarlund-Udenaes, M. and Nordstrom, C.H. Altered brain exposure of morphine in experi-mental meningitis studied with microdialysis. Acta Anaesthesiol
Scand 2004, 48(3), p. 294-301.
[38] Ederoth, P., Tunblad, K., Bouw, R., Lundberg, C.J., Ungerstedt, U., Nordstrom, C.H. and Hammarlund-Udenaes, M. Blood-brain barrier transport of morphine in patients with severe brain trauma. Br J Clin
Pharmacol 2004, 57(4), p. 427-35.
[39] Auguy-Valette, A., Cros, J., Gouarderes, C., Gout, R. and Ponton-nier, G. Morphine analgesia and cerebral opiate receptors: a devel-opmental study. Br J Pharmacol 1978, 63(2), p. 303-8.
[40] Saarenmaa, E., Neuvonen, P.J., Rosenberg, P. and Fellman, V. Mor-phine clearance and effects in newborn infants in relation to gesta-tional age. Clin Pharmacol Ther 2000, 68(2), p. 160-6.
[41] Scott, C.S., Riggs, K.W., Ling, E.W., Fitzgerald, C.E., Hill, M.L., Grunau, R.V., Solimano, A. and Craig, K.D. Morphine pharmacoki-netics and pain assessment in premature newborns. J Pediatr 1999, 135(4), p. 423-9.
[42] Gupta, A., Chatelain, P., Massingham, R., Jonsson, E.N. and Ham-marlund-Udenaes, M. Brain distribution of cetirizine enantiomers: comparison of three different tissue-to-plasma partition coefficients: K(p), K(p,u), and K(p,uu). Drug Metab Dispos 2006, 34(2), p. 318-23.
[43] Chaurasia, C.S., Muller, M., Bashaw, E.D., Benfeldt, E., Bolinder, J., Bullock, R., Bungay, P.M., DeLange, E.C., Derendorf, H., Elm-quist, W.F., et al. AAPS-FDA workshop white paper: microdialysis principles, application and regulatory perspectives. Pharm Res 2007, 24(5), p. 1014-25.
[44] Bungay, P.M., Morrison, P.F. and Dedrick, R.L. Steady-state theory for quantitative microdialysis of solutes and water in vivo and in vi-tro. Life Sci 1990, 46(2), p. 105-19.
[45] Kehr, J. A survey on quantitative microdialysis: theoretical models and practical implications. J Neurosci Methods 1993, 48(3), p. 251-61.
[46] Olson, R.J. and Justice, J.B., Jr. Quantitative microdialysis under transient conditions. Anal Chem 1993, 65(8), p. 1017-22.
[47] Bouw, M.R. and Hammarlund-Udenaes, M. Methodological aspects of the use of a calibrator in in vivo microdialysis-further develop-ment of the retrodialysis method. Pharm Res 1998, 15(11), p. 1673-9.
[48] Lonnroth, P., Jansson, P.A. and Smith, U. A microdialysis method allowing characterization of intercellular water space in humans. Am
[49] Wong, S.L., Wang, Y. and Sawchuk, R.J. Analysis of zidovudine distribution to specific regions in rabbit brain using microdialysis.
Pharm Res 1992, 9(3), p. 332-8.
[50] Wang, Y., Wong, S.L. and Sawchuk, R.J. Microdialysis calibration using retrodialysis and zero-net flux: application to a study of the distribution of zidovudine to rabbit cerebrospinal fluid and thalamus.
Pharm Res 1993, 10(10), p. 1411-9.
[51] Pierson, R.N., Jr., Price, D.C., Wang, J. and Jain, R.K. Extracellular water measurements: organ tracer kinetics of bromide and sucrose in rats and man. Am J Physiol 1978, 235(3), p. F254-64.
[52] Friden, M., Ljungqvist, H., Middleton, B., Bredberg, U. and Ham-marlund-Udenaes, M. Improved measurement of drug exposure in the brain using drug-specific correction for residual blood. J Cereb
Blood Flow Metab 2009.
[53] Todd, M.M., Weeks, J.B. and Warner, D.S. Cerebral blood flow, blood volume, and brain tissue hematocrit during isovolemic hemo-dilution with hetastarch in rats. Am J Physiol 1992, 263(1 Pt 2), p. H75-82.
[54] Smith, Q.R., Ziylan, Y.Z., Robinson, P.J. and Rapoport, S.I. Kinetics and distribution volumes for tracers of different sizes in the brain plasma space. Brain Res 1988, 462(1), p. 1-9.
[55] Preston, E. and Haas, N. Defining the lower limits of blood-brain barrier permeability: factors affecting the magnitude and interpreta-tion of permeability-area products. J Neurosci Res 1986, 16(4), p. 709-19.
[56] Shafer, S.L., Siegel, L.C., Cooke, J.E. and Scott, J.C. Testing com-puter-controlled infusion pumps by simulation. Anesthesiology 1988, 68(2), p. 261-6.
[57] Ekblom, M., Hammarlund-Udenaes, M. and Paalzow, L. Modeling of tolerance development and rebound effect during different intra-venous administrations of morphine to rats. J Pharmacol Exp Ther 1993, 266(1), p. 244-52.
[58] Allen, J.D., van Loevezijn, A., Lakhai, J.M., van der Valk, M., van Tellingen, O., Reid, G., Schellens, J.H., Koomen, G.J. and Schinkel, A.H. Potent and specific inhibition of the breast cancer resistance protein multidrug transporter in vitro and in mouse intestine by a novel analogue of fumitremorgin C. Mol Cancer Ther 2002, 1(6), p. 417-25.
[59] Bas, A., Forsberg, G., Hammarstrom, S. and Hammarstrom, M.L. Utility of the housekeeping genes 18S rRNA, beta-actin and glyceraldehyde-3-phosphate-dehydrogenase for normalization in real-time quantitative reverse transcriptase-polymerase chain
reac-quantitative RT-PCR. Brain Res Dev Brain Res 2005, 156(1), p. 38-45.
[61] Joel, S.P., Osborne, R.J. and Slevin, M.L. An improved method for the simultaneous determination of morphine and its principal glu-curonide metabolites. J Chromatogr 1988, 430(2), p. 394-9.
[62] Barfield, C.P., Yu, V.Y., Noma, O., Kukita, J., Cussen, L.J., Oates, A. and Walker, A.M. Cerebral blood volume measured using near-infrared spectroscopy and radiolabels in the immature lamb brain.
Pediatr Res 1999, 46(1), p. 50-6.
[63] Milne, R.W., McLean, C.F., Mather, L.E., Nation, R.L., Runciman, W.B., Rutten, A.J. and Somogyi, A.A. Influence of renal failure on the disposition of morphine, 3-glucuronide and morphine-6-glucuronide in sheep during intravenous infusion with morphine. J
Pharmacol Exp Ther 1997, 282(2), p. 779-86.
[64] Bungay, P.M., Dedrick, R.L., Fox, E. and Balis, F.M. Probe calibra-tion in transient microdialysis in vivo. Pharm Res 2001, 18(3), p. 361-6.
[65] Ekblom, M., Hammarlund-Udenaes, M., Lundqvist, T. and Sjoberg, P. Potential use of microdialysis in pharmacokinetics: a protein binding study. Pharm Res 1992, 9(1), p. 155-8.
[66] Bostrom, E., Hammarlund-Udenaes, M. and Simonsson, U.S. Blood-brain barrier transport helps to explain discrepancies in in vivo po-tency between oxycodone and morphine. Anesthesiology 2008, 108(3), p. 495-505.
[67] Stain-Texier, F., Boschi, G., Sandouk, P. and Scherrmann, J.M. Ele-vated concentrations of morphine 6-beta-D-glucuronide in brain ex-tracellular fluid despite low blood-brain barrier permeability. Br J
Pharmacol 1999, 128(4), p. 917-24.
[68] Bouw, M.R., Gardmark, M. and Hammarlund-Udenaes, M. Pharma-cokinetic-pharmacodynamic modelling of morphine transport across the blood-brain barrier as a cause of the antinociceptive effect delay in rats--a microdialysis study. Pharm Res 2000, 17(10), p. 1220-7. [69] Xie, R., Bouw, M.R. and Hammarlund-Udenaes, M. Modelling of
the blood-brain barrier transport of morphine-3-glucuronide studied using microdialysis in the rat: involvement of probenecid-sensitive transport. Br J Pharmacol 2000, 131(8), p. 1784-92.
[70] Bostrom, E., Simonsson, U.S. and Hammarlund-Udenaes, M. In vivo blood-brain barrier transport of oxycodone in the rat: indica-tions for active influx and implicaindica-tions for pharmacokinet-ics/pharmacodynamics. Drug Metab Dispos 2006, 34(9), p. 1624-31. [71] Broccardo, C., Nieoullon, V., Amin, R., Masmejean, F., Carta, S.,
Tassi, S., Pophillat, M., Rubartelli, A., Pierres, M., Rougon, G., et al. ABCA2 is a marker of neural progenitors and neuronal subsets in the adult rodent brain. J Neurochem 2006, 97(2), p. 345-55.
[72] Bronstein, J.M., Chen, K., Tiwari-Woodruff, S. and Kornblum, H.I. Developmental expression of OSP/claudin-11. J Neurosci Res 2000, 60(3), p. 284-90.
[73] Zhang, F., Zhang, W., Liu, L., Fisher, C.L., Hui, D., Childs, S., Dorovini-Zis, K. and Ling, V. Characterization of ABCB9, an ATP binding cassette protein associated with lysosomes. J Biol Chem 2000, 275(30), p. 23287-94.
[74] Kobayashi, A., Maeda, T. and Maeda, M. Membrane localization of transporter associated with antigen processing (TAP)-like (ABCB9) visualized in vivo with a fluorescence protein-fusion technique. Biol
Pharm Bull 2004, 27(12), p. 1916-22.
[75] Vannucci, S.J. and Simpson, I.A. Developmental switch in brain nutrient transporter expression in the rat. Am J Physiol Endocrinol
Metab 2003, 285(5), p. E1127-34.
[76] Vorbrodt, A.W., Dobrogowska, D.H. and Tarnawski, M. Immu-nogold study of interendothelial junction-associated and glucose transporter proteins during postnatal maturation of the mouse blood-brain barrier. J Neurocytol 2001, 30(8), p. 705-16.
[77] Ballabh, P., Hu, F., Kumarasiri, M., Braun, A. and Nedergaard, M. Development of tight junction molecules in blood vessels of germi-nal matrix, cerebral cortex, and white matter. Pediatr Res 2005, 58(4), p. 791-8.
[78] Hirase, T., Staddon, J.M., Saitou, M., Ando-Akatsuka, Y., Itoh, M., Furuse, M., Fujimoto, K., Tsukita, S. and Rubin, L.L. Occludin as a possible determinant of tight junction permeability in endothelial cells. J Cell Sci 1997, 110 (Pt 14), p. 1603-13.
[79] Schumacher, U. and Mollgard, K. The multidrug-resistance P-glycoprotein (Pgp, MDR1) is an early marker of blood-brain barrier development in the microvessels of the developing human brain.
Histochem Cell Biol 1997, 108(2), p. 179-82.
[80] Virgintino, D., Errede, M., Girolamo, F., Capobianco, C., Robertson, D., Vimercati, A., Serio, G., Di Benedetto, A., Yonekawa, Y., Frei, K., et al. Fetal blood-brain barrier P-glycoprotein contributes to brain protection during human development. J Neuropathol Exp
Neurol 2008, 67(1), p. 50-61.
[81] Tsai, C.E., Daood, M.J., Lane, R.H., Hansen, T.W., Gruetzmacher, E.M. and Watchko, J.F. P-glycoprotein expression in mouse brain increases with maturation. Biol Neonate 2002, 81(1), p. 58-64. [82] Matsuoka, Y., Okazaki, M., Kitamura, Y. and Taniguchi, T.
Devel-opmental expression of P-glycoprotein (multidrug resistance gene product) in the rat brain. J Neurobiol 1999, 39(3), p. 383-92.
[83] Daood, M., Tsai, C., Ahdab-Barmada, M. and Watchko, J.F. ABC transporter (P-gp/ABCB1, MRP1/ABCC1, BCRP/ABCG2) expres-sion in the developing human CNS. Neuropediatrics 2008, 39(4), p. 211-8.
[85] de Zwart, L., Scholten, M., Monbaliu, J.G., Annaert, P.P., Van Houdt, J.M., Van den Wyngaert, I., De Schaepdrijver, L.M., Bailey, G.P., Coogan, T.P., Coussement, W.C., et al. The ontogeny of drug metabolizing enzymes and transporters in the rat. Reprod Toxicol 2008, 26(3-4), p. 220-30.
[86] Gerk, P.M., Oo, C.Y., Paxton, E.W., Moscow, J.A. and McNamara, P.J. Interactions between cimetidine, nitrofurantoin, and probenecid active transport into rat milk. J Pharmacol Exp Ther 2001, 296(1), p. 175-80.
[87] Kari, F.W., Weaver, R. and Neville, M.C. Active transport of nitro-furantoin across the mammary epithelium in vivo. J Pharmacol Exp