Examensarbete, 15 hp
Biomedicinsk analytikerprogrammet, 180 hp VT 2019
Inverkan av apolipoprotein E4 vid HSV1-infektion av
GMK- och SH-SY5Y-celler
Ida Brolin
Institutionen för Klinisk mikrobiologi Biomedicinsk analytikerprogrammet
Examensarbete, 15 hp
Kursansvarig: Ylva Hedberg Fransson ylva.hedberg.fransson@umu.se
Läraropponent:
Mari Norgren
Examinator:
Ylva Hedberg Fransson
Datum för godkännande:
2019 06 19
Influence of Apolipoprotein E4 on Herpes Simplex Virus type 1-Infection in GMK and SH-SY5Y cells
Handledare
Marta Bally, Institutionen för klinisk mikrobiologi, Umeå universitet
Nyckelord
ApolipoproteinE4, SH-SY5Y, GMK, HSV-1, infektion, optimering, cellbaserad plattform, fluorescens
3
Abstrakt
Etiologin till Alzheimers sjukdom (AD) är inte känd, men olika riskfaktorer har kunnat ringas in.
Genotypen som kodar för isoformen Apolipoprotein E4 (ApoE4) samt herpes simplex virus typ 1 (HSV1) är två riskfaktorer, som tycks samverka, men hur har inte klarlagts. Syftet med studien var att undersöka hur närvaro av fritt ApoE4, inverkar på HSV1-infektion i GMK- samt SH-SY5Y-celler.
Cellerna infekterades med HSV1, med en gen som inkorporerar grönt fluorescerande protein i
kapsiden och upprepad avläsning gjordes med mikroplattavläsaren Trophos. Vid infektion i närvaro av ApoE4, inkuberades virus med ApoE4 och serumfritt odlingsmedel under 165 min i rumstemperatur.
Cellerna inkuberades med virus och ApoE4 under 2 tim och den globala fluorescensen på Trophos- bilderna analyserades. Det skiljde i fluorescens i de infekterade cellerna, av båda celltyperna, från negativa kontrollceller. Vid infektion i närvaro av ApoE4 sågs en lägre fluorescens i GMK-cellerna, medan en kraftigare fluorescens i virus infekterade SH-SY5Y-celler. Konklusionen var att närvaro av fritt ApoE4 inhiberar infektion i GMK-celler medan den förstärker infektionen i SH-SY5Y-celler.