Cancer är en ledande dödsorsak i världen och är ett samlingsnamn på många olika sjukdomar. Cancer utlöses av att DNA i en cell muteras. Mutationen kan påverka gener som kodar för specifika proteiner, vilka kontrollerar cellen. Cel- len blir då okontrollerbar och vissa cancerformer kan metastaseras till andra organ i kroppen. Cancerceller kännetecknas av förmågan att undvika apoptos, det vill säga programmerad celldöd. Apoptos karakteriseras av en mängd olika cellulära morfologiska förändringar. I normala celler är celldöd och celldelning strikt kontrollerat via olika signaleringsvägar, där olika proteiner aktiveras eller inaktiveras beroende på vilken signal cellen får.
I Sverige insjuknar ca 400 människor i kronisk lymfatisk leukemi (KLL) varje år och medianåldern för diagnos är 72 år. KLL påverkar B-celler i kroppen. B- celler producerar antikroppar, vilka angriper främmande organismer som en del av immunförsvaret. KLL cancerceller växer långsamt, vilket gör att de inte alltid slås ut av kemoterapeutiska läkemedel.
Avhandlingen har framför allt fokuserat på biomarkörer och teknikutveckling i cancerforskning för en bättre diagnos och en framtida individuell patientbe- handling. Syftet med studie I var att analysera olika signaleringsvägar i KLL som kan förhindra celltillväxten. Vi har analyserat ett protein som heter SHP-1 och som visar högt uttryck i KLL-celler. SHP-1 är en signalmolekyl och har sin normala funktion i cellulära processer, inklusive celltillväxt och differentiering. Vår hypotes är att SHP-1 är högre uttryckt i perifert blod och därmed förhind- rar tillväxten av KLL celler, jämfört med lymfknutan. Resultatet visar att hälf- ten av de analyserade patientproverna uttryckte högre SHP-1 i perifert blod jämfört med lymfknutan. Dock kunde vi inte se någon skillnad mellan SHP-1 aktivitet i perifert blod och lymfknutan.
Det är en utmaning för forskare att finna optimal behandling av cancer. Ofta är det svårt att diagnostisera cancer i ett tidigt stadium. Strävan att finna effektiv
45 teknik och nya biomarkörer för att upptäcka cancer i ett tidigt stadium har varit fokus för forskare i flera år. I studie II har vi undersökt sialinsyra som finns på cellytan. Sialinsyra, som är en del av kolhydratstrukturer, är känd för att vara högt uttryckt i cancerceller och ännu högre i metastaserande celler. Sialinsyra är svår att mäta för att det är svårt att producera antikroppar mot kolhydrat-
strukturer. Syftet med arbete II var att mäta sialinsyra på cancerceller genom att
använda teknologin molekylärt präglade polymerer, MIP. Med hjälp av MIP som binder till sialinsyra har vi lyckats mäta och klassificera sialinsyra i aggres- siva KLL-celler jämfört med andra mindre aggressiva KLL-celler. Framtida MIP forskning kan leda till tidig diagnos av cirkulerande cancer celler.
Digital holografi (DH) mikroskopi är ett mikroskop med en inbyggd laser som kan analysera levande celler direkt i odlingskärlen. Man får en 3D-bild av cel- lerna och uppgifter om olika morfologiska mätvärden som antal celler, celltät- het, area, volym och tjocklek av cellerna i odlingskärlet. Syftet med studie III var att analysera celldöd med hjälp av DH-mikroskopi på behandlade celler. Vi har behandlat två cellinjer med kemoterapeutiska läkemedel och analyserat dem med DH-mikroskopi under flera dagar. Resultaten visar typiska apoptoskarak- tärer där volymen, arean och tjockleken minskar och cellerna krymper ihop. Vi har kunnat mäta specifika skillnader mellan cellinjerna som resultat av kemo- terapirespons. Framtida forskningsområden kan inkludera patientprover där man snabbt och enkelt kan testa olika behandlingar med DH, för att sedan välja den behandling som patienten svarade bäst på. Detta innebär en möjlighet att skräddarsy cancerbehandling för den enskilde patienten.
DH-mikroskopi har främst använts för celler som växer på ytan i botten av odlingskärl. Det har varit en utmaning att analysera leukemiceller med DH- mikroskopi eftersom leukemiceller flyter runt, vilket gör det svårt att analysera. Syftet med studie IV var att mäta celldöd av leukemiceller med hjälp av DH- mikroskopi kombinerad med en antikroppsbaserad analys. Vi har först fångat upp cellerna med specifika antikroppar som är bundna på en yta och sedan behandlat cellerna med kemoterapi och analyserat med DH-mikroskopi. Resul- tatet visade att cellerna band specifikt till antikropparna och satt bundna där under hela analysen. Behandlingen med kemoterapi visade typiska apoptos- karaktärer där cellvolymen, arean och tjockleken minskade. Här kunde vi också konstatera olikheter i cellrespons hos de två olika cellinjerna. Det bekräftar våra resultat där behandlingsrespons kan användas för bättre individuell patientbe- handling.
46
Sammanfattningsvis tar denna avhandling ett steg längre inom cancerforsk- ningen, vilket skulle kunna leda till en mer individualiserad behandling för pa- tienter och för diagnos av cirkulerande och metastaserande cancerceller i krop- pen.
47
ACKNOWLEDGMENTS
Jag vill tacka alla som har varit involverade i min avhandling och speciellt tack till min huvudhandledare AnetteAnetteAnetteAnette, för att ha introducerat mig till forskningsvärl- den redan 2007, och gett mig möjligheten att doktorera på Malmö Högskola. Tack för att du alltid har brytt dig och gett mig all den tid jag behövde. Framför allt tack för ditt tålamod, din vänlighet och omtanke.
Jag vill rikta ett stort tack till mina handledare GunillaGunillaGunillaGunilla och LarsLarsLarsLars för våra veten- skapliga diskussioner och för ert stora intresse för mina projekt. Lars Lars Lars Lars tack för all hjälp med q-PCR och för att du alltid har varit positiv och uppmuntrat mig. Tack HåkanHåkanHåkan för att du har varit en utmärkt examinator. Tack ZoltanHåkan ZoltanZoltanZoltan för språk- granskning.
Tack till alla medförfattare på arbetena, det hade inte gått utan er! Anders
AndersAnders
Anders och AnnAnnAnn----CharlotteAnnCharlotteCharlotteCharlotte tack för ett bra samarbete. Börje Börje Börje Börje och Sudhirkumar Sudhirkumar Sudhirkumar Sudhirkumar tack för era diskussioner och ert positiva sätt att se på saker. Nishtman Nishtman Nishtman tack för Nishtman all mikroskoperingstiden, och framför allt tack för att du alltid fanns när jag behövde dig. Stort tack till KerstiKerstiKerstiKersti och BirgitBirgitBirgitBirgit från Phase Holographic Imaging
för hjälpen med DH mikroskopet och supporten under alla dessa år.
Jag vill tacka alla doktorander som har funnits under min resas gång. De som har slutat AntonAntonAntonAnton, CathrineCathrineCathrineCathrine, MagnusMagnus, YanaMagnusMagnus YanaYanaYana, PeterPeterPeterPeter, MarkMarkMarkMark och de som är efter Celina,
Celina, Celina,
Celina, DimitriDimitriDimitriDimitri, Elena, Olga,Elena, Olga,Elena, Olga,Elena, Olga, och Sing Sing Sing Sing lycka till med er avhandling. Monzer
MonzerMonzer
Monzer tack för din hjälp med allt tekniskt, tack för din uppmuntran och din vänlighet. Utan dig hade inget gått! Tack VedrVedrVedran Vedran an an för din hjälp med det tekniska. Maria
Maria Maria
Maria jag är glad att jag fick lära känna dig, tack för all den tid och lycka till med ditt nya jobb.
Ett särskilt tack till mina kära gymnasievänner AnnaAnnaAnnaAnna, Hina, Khoan, Nazira Hina, Khoan, Nazira Hina, Khoan, Nazira och Hina, Khoan, Nazira Rachelle
RachelleRachelle
Rachelle, tack för att ni är så underbara. Tack för att ni alltid påminner mig om andra roliga saker i livet än jobb. Min bästa vän Falastin, Falastin, Falastin, Falastin, varje gång vi träffas
48
rusar tiden iväg och vi hinner aldrig prata färdigt. Tack för allt och lycka till med din avhandling!
Ett stort tack till mina underbara systrar AmalAmalAmalAmal, SafahSafahSafah och WafaaSafah WafaaWafaaWafaa, tack för att ni alltid finns när jag behöver er ♥ och för att ni alltid bryr er om mig. Mo-Mo-Mo-Mo- hammed
hammedhammed
hammed, AhmedAhmedAhmedAhmed och OmarOmarOmarOmar tack för allt, ni är de bästa bröder man kan önska sig! MammaMammaMammaMamma och pappapappapappapappa jag kan nog inte tacka er tillräckligt men tack för att ni får mig alltid att känna att jag klarar allt och att ni är alltid stolta över mig hur det än går. Tack för er hjälp och stöd!
Allra mest vill jag tacka min Alaeddin, Alaeddin, Alaeddin, tack för att du alltid har trott på mig, Alaeddin, stöttat mig, uppmuntrat och hjälpt mig. Tack för att du är alltid så snäll och så underbar. LeithLeithLeith och JasminLeith JasminJasminJasmin mina älsklingar, ni betyder allt för mig!
49
REFERENCES
Adamczyk, Barbara, Tharmalingam, Tharmala & Rudd, Pauline M. (2012). Glycans as can-
cer biomarkers. Biochimica Et Biophysica Acta (BBA)-General Subjects, vol. 1820 nr. 9 s.
1347-1353.
Alexander, Cameron, Andersson, Håkan S., Andersson, Lars I., Ansell, Richard J., Kirsch, Nicole, Nicholls, Ian A. et al (2006). Molecular imprinting science and technology: a sur-
vey of the literature for the years up to and including 2003. Journal of Molecular Recog-
nition, vol. 19 nr. 2 s. 106-180.
Alibek, K., Irving, S., Sautbayeva, Z., Kakpenova, A., Bekmurzayeva, A., Baiken, Y. et al (2014). Disruption of Bcl-2 and Bcl-xL by viral proteins as a possible cause of cancer.
Infectious Agents and Cancer, vol. 9s. 44-9378-9-44. eCollection 2014.
Alm, Kersti, Cirenajwis, Helena, Gisselsson, Lennart, Gjörloff Wingren, Anette, Janicke, Bir- git, Mölder, Anna et al (2011). Digital Holography and Cell Studies. Holography, Re- search and Technologies. (Rosen, Joseph uppl.). Rijeka, Croatia: In Tech. (s. 237-252) Alm, Kersti, El-Schich, Zahra, Miniotis, Maria F., Wingren, Anette G., Janicke, Birgit &
Oredsson, Stina (2013). Cells and Holograms–Holograms and Digital Holographic Mi- croscopy as a Tool to Study the Morphology of Living Cells.
Alonso, Andres, Sasin, Joanna, Bottini, Nunzio, Friedberg, Ilan, Friedberg, Iddo, Osterman,
Andrei et al (2004). Protein tyrosine phosphatases in the human genome. Cell, vol. 117
nr. 6 s. 699-711.
Amin, HM, Hoshino, K., Yang, H., Lin, Q., Lai, R. & Garcia‐Manero, G. (2007). Decreased expression level of SH2 domain‐containing protein tyrosine phosphatase‐1 (Shp1) is asso-
ciated with progression of chronic myeloid leukaemia. The Journal of Pathology, vol. 212
nr. 4 s. 402-410.
Apollonio, B., Scielzo, C., Bertilaccio, M. T., Ten Hacken, E., Scarfo, L., Ranghetti, P. et al
(2013). Targeting B-cell anergy in chronic lymphocytic leukemia. Blood, vol. 121 nr. 19
s. 3879-88, S1-8.
Ashkenazi, Avi (2015). Targeting the extrinsic apoptotic pathway in cancer: Lessons learned and future directions. Journal of Clinical Investigation, vol. 125 nr. 2 s. 487.
Ashkenazi, Avi & Salvesen, Guy (2014). Regulated cell death: signaling and mechanisms.
Annual Review of Cell and Developmental Biology, vol. 30s. 337-356.
Baig, S., Seevasant, I., Mohamad, J., Mukheem, A., Huri, HZ & Kamarul, T. (2016). Poten- tial of apoptotic pathway-targeted cancer therapeutic research: Where do we stand&quest.
50
Baliakas, P., Mattsson, M., Stamatopoulos, K. & Rosenquist, R. (2015). Prognostic indices
in chronic lymphocytic leukaemia: where do we stand how do we proceed? Journal of
Internal Medicine,
Barber, Nicole, Gez, Swetlana, Belov, Larissa, Mulligan, Stephen P., Woolfson, Adrian & Christopherson, Richard I. (2009). Profiling CD antigens on leukaemias with an antibody
microarray. FEBS Letters, vol. 583 nr. 11 s. 1785-1791.
Belov, Larissa, Mulligan, Stephen P., Barber, Nicole, Woolfson, Adrian, Scott, Mike, Stoner, Kerryn et al (2006). Analysis of human leukaemias and lymphomas using extensive im-
munophenotypes from an antibody microarray. British Journal of Haematology, vol. 135
nr. 2 s. 184-197.
Bergh, A. C., Evaldsson, C., Pedersen, L. B., Geisler, C., Stamatopoulos, K., Rosenquist, R. et al (2014). Silenced B-cell receptor response to autoantigen in a poor-prognostic subset
of chronic lymphocytic leukemia. Haematologica, vol. 99 nr. 11 s. 1722-1730.
Binet, JL, Auquier, A., Dighiero, G., Chastang, Cl, Piguet, H., Goasguen, J. et al (1981). A new prognostic classification of chronic lymphocytic leukemia derived from a multivariate survival analysis. Cancer, vol. 48 nr. 1 s. 198-206.
Blume-Jensen, Peter & Hunter, Tony (2001). Oncogenic kinase signalling. Nature, vol. 411
nr. 6835 s. 355-365.
Borrebaeck, Carl A. & Wingren, Christer (2011). Recombinant antibodies for the generation
of antibody arrays. Protein MicroarraysSpringer. (s. 247-262)
Brockdorff, Johannes, Williams, Scott, Couture, Clement & Mustelin, Tomas (1999).
Dephosphorylation of ZAP-70 and inhibition of T cell activation by activated SHP1. Eu-
ropean Journal of Immunology, vol. 29 nr. 8 s. 2539-2550.
Buchner, M. & Muschen, M. (2014). Targeting the B-cell receptor signaling pathway in B
lymphoid malignancies. Current Opinion in Hematology, vol. 21 nr. 4 s. 341-349.
Cambier, John C., Gauld, Stephen B., Merrell, Kevin T. & Vilen, Barbara J. (2007). B-cell anergy: from transgenic models to naturally occurring anergic B cells? Nature Reviews Immunology, vol. 7 nr. 8 s. 633-643.
Carl, Daniel, Kemper, Björn, Wernicke, Günther & von Bally, Gert (2004). Parameter-opti-
mized digital holographic microscope for high-resolution living-cell analysis. Applied Op-
tics, vol. 43 nr. 36 s. 6536-6544.
Cerutti, Andrea, Puga, Irene & Cols, Montserrat (2011). Innate control of B cell responses.
Trends in Immunology, vol. 32 nr. 5 s. 202-211.
Chaffer, C. L. & Weinberg, R. A. (2011). A perspective on cancer cell metastasis. Science
(New York, N.Y.), vol. 331 nr. 6024 s. 1559-1564.
Chakraborty, Arup K. & Weiss, Arthur (2014). Insights into the initiation of TCR signaling.
Nature Immunology, vol. 15 nr. 9 s. 798-807.
Chalut, Kevin J., Ekpenyong, Andrew E., Clegg, Warren L., Melhuish, Isabel C. & Guck, Jochen (2012). Quantifying cellular differentiation by physical phenotype using digital holographic microscopy. Integr.Biol., vol. 4 nr. 3 s. 280-284.
51 Chen, L., Widhopf, G., Huynh, L., Rassenti, L., Rai, K. R., Weiss, A. et al (2002). Expression of ZAP-70 is associated with increased B-cell receptor signaling in chronic lymphocytic
leukemia. Blood, vol. 100 nr. 13 s. 4609-4614.
Chiorazzi, Nicholas, Rai, Kanti R. & Ferrarini, Manlio (2005). Chronic lymphocytic leuke-
mia. New England Journal of Medicine, vol. 352 nr. 8 s. 804-815.
Cho, Jaebum, Kushiro, Keiichiro, Teramura, Yuji & Takai, Madoka (2014). Lectin-Tagged
Fluorescent Polymeric Nanoparticles for Targeting of Sialic Acid on Living Cells. Biom-
acromolecules, vol. 15 nr. 6 s. 2012-2018.
Coleman, Mathew L., Marshall, Christopher J. & Olson, Michael F. (2004). RAS and RHO
GTPases in G1-phase cell-cycle regulation. Nature Reviews Molecular Cell Biology, vol. 5
nr. 5 s. 355-366.
Colomb, Tristan, Charrière, Florian, Kühn, Jonas, Marquet, Pierre & Depeursinge, Christian (2008). Advantages of digital holographic microscopy for real-time full field absolute phase imaging. Biomedical Optics (BiOS) 2008, International Society for Optics and Pho- tonics s. 686109-686109-10.
Cui, Hongxia, Lin, Yu, Yue, Liling, Zhao, Xuemei & Liu, Jicheng (2011). Differential ex- pression of the α2, 3-sialic acid residues in breast cancer is associated with metastatic po-
tential. Oncology Reports, vol. 25 nr. 5 s. 1365-1371.
Cummings, Richard D. (2009). The repertoire of glycan determinants in the human glycome.
Molecular BioSystems, vol. 5 nr. 10 s. 1087-1104.
Debatin, Klaus-Michael (2004). Apoptosis pathways in cancer and cancer therapy. Cancer
Immunology, Immunotherapy, vol. 53 nr. 3 s. 153-159.
Delfani, Payam & Wingren, Anette G. (2012). Deep Insight Section. Http://AtlasGenetic- sOncology.Org, s. 594.
Dennis, J. W., Laferte, S., Yagel, S. & Breitman, M. L. (1989). Asparagine-linked oligosac-
charides associated with metastatic cancer. Cancer Cells (Cold Spring Harbor, N.Y.:
1989), vol. 1 nr. 3 s. 87-92.
Dexlin‐Mellby, Linda, Sandström, Anna, Antberg, Linn, Gunnarsson, Jenny, Hansson, Ste- fan R., Borrebaeck, Carl A. et al (2011). Design of recombinant antibody microarrays for membrane protein profiling of cell lysates and tissue extracts. Proteomics, vol. 11 nr. 8 s. 1550-1554.
Dexlin‐Mellby, Linda, Sandström, Anna, Centlow, Magnus, Nygren, Sara, Hansson, Stefan R., Borrebaeck, Carl A. et al (2010). Tissue proteome profiling of preeclamptic placenta
using recombinant antibody microarrays. PROTEOMICS-Clinical Applications, vol. 4 nr.
10‐11 s. 794-807.
Dexlin, Linda, Ingvarsson, Johan, Frendéus, Björn, Borrebaeck, Carl A. & Wingren, Christer (2007). Design of recombinant antibody microarrays for cell surface membrane prote-
omics. Journal of Proteome Research, vol. 7 nr. 01 s. 319-327.
Dighiero, Guillaume & Binet, Jacques-Louis (2000). When and how to treat chronic lym-
52
Dylke, Janis, Lopes, Jared, Dang-Lawson, May, Machtaler, Steve & Matsuuchi, Linda (2007). Role of the extracellular and transmembrane domain of Ig-α/β in assembly of the
B cell antigen receptor (BCR). Immunology Letters, vol. 112 nr. 1 s. 47-57.
Eibel, Hermann, Kraus, Helene, Sic, Heiko, Kienzler, Anne-Kathrin & Rizzi, Marta (2014).
B cell biology: an overview. Current Allergy and Asthma Reports, vol. 14 nr. 5 s. 1-10.
Ellmark, Peter, Högerkorp, Carl-Magnus, Ek, Sara, Belov, L., Berglund, Mattias, Rosenquist, Richard et al (2008). Phenotypic protein profiling of different B cell sub-populations using
antibody CD-microarrays. Cancer Letters, vol. 265 nr. 1 s. 98-106.
Elmore, S. (2007). Apoptosis: a review of programmed cell death. Toxicologic Pathology,
vol. 35 nr. 4 s. 495-516.
Else, Monica, Smith, Alastair G., Cocks, Kim, Richards, Sue M., Crofts, Shirley, Wade, Ra- chel et al (2008). Patients’ experience of chronic lymphocytic leukaemia: baseline health‐
related quality of life results from the LRF CLL4 trial. British Journal of Haematology,
vol. 143 nr. 5 s. 690-697.
Ferraro, Pietro, Grilli, Simonetta, Alfieri, Domenico, De Nicola, Sergio, Finizio, Andrea, Pier- attini, Giovanni et al (2005). Extended focused image in microscopy by digital holography.
Optics Express, vol. 13 nr. 18 s. 6738-6749.
Ferreira, José A., Videira, Paula A., Lima, Luís, Pereira, Sofia, Silva, Mariana, Carrascal, Mylene et al (2013). Overexpression of tumour-associated carbohydrate antigen sialyl-Tn
in advanced bladder tumours. Molecular Oncology, vol. 7 nr. 3 s. 719-731.
Fidler, Isaiah J. (2003). The pathogenesis of cancer metastasis: the'seed and soil'hypothesis
revisited. Nature Reviews Cancer, vol. 3 nr. 6 s. 453-458.
Fischer-Fodor, Eva, Miklasova, Natalia, Berindan-Neagoe, Ioana & Saha, Bhaskar (2015).
Iron, inflammation and invasion of cancer cells. Clujul Medical, vol. 88 nr. 3 s. 272.
Friedberg, J. W., Sharman, J., Sweetenham, J., Johnston, P. B., Vose, J. M., Lacasce, A. et al (2010). Inhibition of Syk with fostamatinib disodium has significant clinical activity in
non-Hodgkin lymphoma and chronic lymphocytic leukemia. Blood, vol. 115 nr. 13 s.
2578-2585.
Frigault, M. M., Lacoste, J., Swift, J. L. & Brown, C. M. (2009). Live-cell microscopy - tips and tools. Journal of Cell Science, vol. 122 nr. Pt 6 s. 753-767.
Fujita, Takayuki, Satomura, Atsushi, Hidaka, Mutsuko, Ohsawa, Isao, Endo, Morito & Ohi, Hiroyuki (1999). Inhibitory effect of free sialic acid on complement activation and its sig-
nificance in hypocomplementemic glomerulonephritis. Journal of Clinical Laboratory
Analysis, vol. 13 nr. 4 s. 173-179.
Fujitani, N., Furukawa, J., Araki, K., Fujioka, T., Takegawa, Y., Piao, J. et al (2013). Total cellular glycomics allows characterizing cells and streamlining the discovery process for
cellular biomarkers. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States
of America, vol. 110 nr. 6 s. 2105-2110.
Fulda, S. & Debatin, KM (2006). Extrinsic versus intrinsic apoptosis pathways in anticancer
53
Gabor, Dionys (1949). Microscopy by reconstructed wave-fronts. Proceedings of the Royal
Society of London A: Mathematical, Physical and Engineering Sciences, The Royal Socie- tyvol. 197 nr. 1051 s. 454-487.
Galluzzi, Lorenzo, Vitale, I., Abrams, JM, Alnemri, ES, Baehrecke, EH, Blagosklonny, MV et al (2012a). Molecular definitions of cell death subroutines: recommendations of the
Nomenclature Committee on Cell Death 2012. Cell Death & Differentiation, vol. 19 nr.
1 s. 107-120.
Galluzzi, L., Kepp, O., Trojel-Hansen, C. & Kroemer, G. (2012b). Mitochondrial control of cellular life, stress, and death. Circulation Research, vol. 111 nr. 9 s. 1198-1207. Gérard, Claude & Goldbeter, Albert (2014). The balance between cell cycle arrest and cell
proliferation: control by the extracellular matrix and by contact inhibition. Interface Focus, vol. 4 nr. 3 s. 20130075.
Goldar, S., Khaniani, M. S., Derakhshan, S. M. & Baradaran, B. (2015). Molecular mecha-
nisms of apoptosis and roles in cancer development and treatment. Asian Pacific Journal
of Cancer Prevention : APJCP, vol. 16 nr. 6 s. 2129-2144.
Goldsby, Richard A., Kindt, Thomas J. & Osborne, Barbara A. (2000). Kuby immunology. 4th. Usa.W,
Guarini, A., Chiaretti, S., Tavolaro, S., Maggio, R., Peragine, N., Citarella, F. et al (2008). BCR ligation induced by IgM stimulation results in gene expression and functional
changes only in IgV H unmutated chronic lymphocytic leukemia (CLL) cells. Blood, vol.
112 nr. 3 s. 782-792.
Hallek, M., Cheson, B. D., Catovsky, D., Caligaris-Cappio, F., Dighiero, G., Dohner, H. et al (2008). Guidelines for the diagnosis and treatment of chronic lymphocytic leukemia: a report from the International Workshop on Chronic Lymphocytic Leukemia updating the
National Cancer Institute-Working Group 1996 guidelines. Blood, vol. 111 nr. 12 s. 5446-
5456.
Halverson, Regina, Torres, Raul M. & Pelanda, Roberta (2004). Receptor editing is the main
mechanism of B cell tolerance toward membrane antigens. Nature Immunology, vol. 5 nr.
6 s. 645-650.
Hamblin, Terry J. (2011). Searching for surrogates for IGHV mutations in chronic lympho-
cytic leukemia. Leukemia Research, vol. 35 nr. 11 s. 1432-1435.
Hanahan, Douglas & Weinberg, Robert A. (2000). The hallmarks of cancer. Cell, vol. 100
nr. 1 s. 57-70.
Herishanu, Y., Perez-Galan, P., Liu, D., Biancotto, A., Pittaluga, S., Vire, B. et al (2011). The lymph node microenvironment promotes B-cell receptor signaling, NF-kappaB activation,
and tumor proliferation in chronic lymphocytic leukemia. Blood, vol. 117 nr. 2 s. 563-
574.
Herve, M., Xu, K., Ng, Y. S., Wardemann, H., Albesiano, E., Messmer, B. T. et al (2005). Unmutated and mutated chronic lymphocytic leukemias derive from self-reactive B cell
precursors despite expressing different antibody reactivity. The Journal of Clinical Inves-
54
Hippen, K. L., Schram, B. R., Tze, L. E., Pape, K. A., Jenkins, M. K. & Behrens, T. W. (2005). In vivo assessment of the relative contributions of deletion, anergy, and editing to B cell
self-tolerance. Journal of Immunology (Baltimore, Md.: 1950), vol. 175 nr. 2 s. 909-916.
Hoebe, RA, Van Oven, CH, Gadella, Th W., Dhonukshe, PB, Van Noorden, CJF & Man- ders, EMM (2007). Controlled light-exposure microscopy reduces photobleaching and
phototoxicity in fluorescence live-cell imaging. Nature Biotechnology, vol. 25 nr. 2 s. 249-
253.
Hoellenriegel, J., Meadows, S. A., Sivina, M., Wierda, W. G., Kantarjian, H., Keating, M. J. et al (2011). The phosphoinositide 3'-kinase delta inhibitor, CAL-101, inhibits B-cell re-
ceptor signaling and chemokine networks in chronic lymphocytic leukemia. Blood, vol.