1
Dubbelfärgning av amyloid med
kongorött och specifika antikroppar
Utveckling av en ny metod
Izabell Sörlin
Vårterminen 2015 Examensarbete, 15 hp
2
Institutionen för Klinisk mikrobiologi Biomedicinsk laboratorievetenskap Biomedicinska analytikerprogrammet Examensarbete, 15 hp
Kursansvarige lärare: Ylva Hedberg Fransson ylva.hedberg.fransson@umu.se
Double Staining of Amyloid with Congored and Specific Antibodies Development of a New Method
Handledare: Oleg Alexeyev, Institutionen för Medicinsk Biovetenskap, Umeå universitet
Läraropponent: Ylva Hedberg Fransson Examinator: Mari Norgren
3
Abstrakt
Amyloid är olösliga proteiner som kan orsaka amyloidos, ett sjukdomstillstånd där normala funktionsdugliga proteiner genomgår en konformationsförändring, strukturen gör att enzymer har svårt att bryta ner amyloid vilket ger amyloidinlagringar i kroppen. Diagnos av amyloidos görs morfologiskt utifrån vävnadsbiopsier med färgningsmetoden kongorött. Av kongorött bildas
äppelgröna dubbelbrytningar, under polariserat ljus, som är specifik för amyloidos diagnostik. Syftet med denna studie var att utveckla en klinisk metod för att kunna bekräfta fynd av amyloidinlagringar i vävnadsbiopsier. En positiv kontrollvävnad från human fettbiopsi samt 25 patientprover från olika vävnader användes. Kontrollvävnaden färgades med kongoröd följt av immunfluorescens, sedan kombinerades dessa metoder med DAPI. Patientproverna färgades med kongoröd och
immunfluorescens. Trippelfärgningen som gjordes på vävnadskontrollen visade tydlig inbindning av antikroppen och en tydlig struktur av amyloid. Av de 25 patientproverna som undersökts var 22 positiva för både kongoröd och immunfluorescens. Slutsatsen var att metoden gör det möjligt att screena för och verifiera amyloid förekomst. Metoden kommer att användas som rutindiagnostik vid klinisk patologis verksamhet.
