Succession af mider og svampe i foderhs i Island
THORKIL E. HALLAS og SUZANNE GRAVESEN
En arbejdgruppe under den islandske sundheds- styrelse har i nogle ir beskeftiget sig med irsager- ne til luftvejssygdomme i forbindelse med hAndte- ring affoderh6 i Island. Som en delafdenne grup- pe har vi hver for sig set pi hhv. mikrofauna og mikroflora i de islandske holader (Gislason et al.
1985 a. b, Gravesen et al. 1983, Gudmundsson &
Hallas 1985, Hallas 1981. Hallas & Gudmundsson 198-5. I narverende arbejede ser vi pi mider og svampe i det samme prOvemateriale og giver - for
forste gang - cn oversigt over miders og svampes succession i ho.
Ho er torret gres. Efter indlagringen nedbrydes hdct, men det gar ikke lige hurtigt overalt i homas- scn. Derved opstir der omrider, dcr har forskellig biologisk alder. selvom hoet har samme kronolo- giske alder. Det cr organismernes succession i for- hotd til den biologiske alder, dvs hOets grad af ncdbrydning, vi har valgt at kortlagge.
Hallas, T. E. & (iravesen. S.: Succession af mider og svampe i foderho i lsland. [Succession of mites and microfungi in stored hay in lceland.l- Ent. Tidskr. 108: 23-27. Umei, Sweden
1987. ISSN 0013-886x.
The arthropod-community of a bale of one year old hay was observed by cross-sectioning. A total of 34 taxa were found. Lepidoglyphus destructot was the pioneer mite, an
<lAcarus farris, appeared later in the succession leaving a crowd of deutonymphs in the most degraded part of the hav.
Another study was based upon 48 samples of bulk hay stored for 4 months. Here 11 taxa of mites (and collembolans) were found along with 15 genera of microfungi isolated on 7.5 % Malt-Salt-Agar., with Eurotium sp. and Emericella nidulans as the most frequently encoun- tered taxa, Thcir counts were related to the Carbon/Nitosen ratio and water activity - two pa-
rameters associated with the state of degradation ol thc hay. We used the Spcarman Rank Cor- relation to construct a scheme of succession according to the biological age of the hay. The scheme shows thal the fungi had their highest density of colonies in just slightly degraded hay.
Later in the succession - and antagonistic to the fungi - the mites had their peak counts, with L destructor bef.ore.A. /arris. In the biologically oldest hay the mites fyd?6 spp. and Pygmep- horus islandictts along with Collembola were best repr(jsented. Results of this investigation might be useful for medical doctors in attempt to elucidate the specific allergenic exposure to organisms in hay-dust inhaled of Icclandic farmers and may also provide a first survey of how the breakdown processes of hay ma), work on the level of organisms.
T. E. Hallus, Statens Skaded-trlaboratorium, Skovbrynet 14, DK-2800 Lynghy, Denmark.
S. Gravesen, Allergologisk Laboratorium, Ved Amagerbanen 23, D K-2.100 Kgbenhovn S, Denmark.
Materiale og metode
Arbejdet falder ito delc. Forste del er en kvalita- tiv undersogclse af midernes fordeling i et snit gennem en balle ho. Anden del cr cn kvantitativ analvse af mider, svampe og fysisk-kemiske para- metre i pr@ver fra flere lagre.
Forste del (1982)
En
et ir gammel hoballe stod direkte pe et jord- gulv i en ladc vcd Hvannevri Landbrugsskole.
Borgarnes. Island. Med et prOvebor, 4 cm i dia-
meter, blev der udtaget en sOjlc af hO, ovenfra og
nedefter. Sojten var 3l cm lang og rcprrsenterede
en nedbrydningsgradient - frisk hO foroven og sli-
mct, jordblandet ho forneden. Den blev straks
delt i9 dele. som blev ekstraheret iBerleseappara-
ter. Op til 2(X) dyr fra hver del blev identificeret.
24 Thnrkil E. Ilallas & Suzonne Gravesen
slides og identificcret. Fra dette blev beregnet an- tal individer/kg ho.
Til analyse for svampe blcv afvejet 100 mg ho i sme stumpcr, dcr blev podet pi7 ,5 % Malt-Salt- Agar (Laccy. pcrs. comm.). Efter inkubering og talling blcv noglc af kolonierne dyrket med hen- blik ph supplerende identifikation. Resultatet cr opgjort som antal kolonier/0,1 g ho.
Carbon/Nitrogen - forholdct blcv bestcmt ved clementeranalyser, Walkley-Black (for C), Kjel- dahl (for N) samt Carlo Erbas Elcmcntal-analyzer (for bide C og N). Disse dobbcltbcstcmte C og N '/" gav folgende C/N - forhold: 14,4-26.4; middel
2l.l . For at szcttc organismernes maksimale tet-
heder i forhold til h@ets nedbrydning valgte vi at ladc deres individuelle Spearman Rank Correla- tion (R,,) til C/N og vandaktivitcten hestemme de- rcs plads i succcssioncn.
Resultater Forste del (1982)
Det ses i Fig. 1, at fundene fra hoballesnittet udcn videre kan arrangeres som en succession. Dct skyldcs bl. a.. at ingen kategori forckom i alle 9 zo- ner, samt. at dyrene enten sis i en zone eller i flerc sammcnhangende zoner. Det scs ogsa. at nogle cnkelte arters forskellige stadicr og k@n fordeler sig pA samme karakteristiskc miidc.
Tab. l. Mider og collemboler i .1ti prover af 4 mencdcr gummclt ho (l'r83). Koncentrationen er angivct ir'm
dy r/kg.
Mites and springtails in 48 samplcs of 4-months-old hay (1983). The density is given as no. of individuals/kg.
Koncentration (density)
Taxa maxlmum
L.pidoglyphu. d..kuclor,aa t.de.rru.ror,9 ?
Ch.vl.tu..rudltui, tar3onomsB rp.l,L ra,.on.hu..p.r.99
^c6ru. l.r.l.,dd Ty.ophasu. lo.glot
. ct.nogtyphua ploElgor KI..m.nnla pluol9€..
Tar6on€n!..o.r.dd L-d6.iructor,dd .Cry0lo.llgmat..9p.
. Cox.nbol. .PP, 'L.desrrrctor,N2 . M..ortlgn6t6 .Dp.
. a.r.,,r.,99
. a.drola€l!pa cr.6ll3 . A.r.rrlr,??
' L.lhrldlu. Elnulu..L
. rarronem,a rpZ,?9 .. c.loslyphu. .nlroglyphold..,Nl
c.rhlzosryphotd€8,N2+9Q PrgEaphorua lalandlcua
Fig. I . Succession af arthropoder i ct snit gcnnem en bal- le ho, dcr havde stiet pa et jordgulv i I Ar. f)e sorlc stre- gcr viser tilstcdcvarelsen af en art eller et stadium i dct pigitldende lag. Q cr gravide hunner. I)e ovrige hunncr betegncs mcd I . 1-, N I . N2, N3 er larver, protonymfer, deutonvmfer og trilonymfer.
Arthropod succession in a bale of hav situatcd on a soil floor tbr one vear. Black bars showc thc prcsence of the indicated tax; and stages. Q are gravid'fcmales. Non- gravid females are t . L. N 1. N2. N3 indicate larvae, pro- tonymphs, deutonymphs and tritonymphs.
Det noteredes ihvilke lag, de cnkelte kategorier af dvr var reprrsenterede.
Anden del ( 1983)
I trc holader vcd Hvanneyri Landbrugsskole udto- ges mcd hinden 4tl prover af 4 mincder gammelt.
lost ho. Proverne var pi ca. 200 g hver og blev ta- get med henblik pir at opna stor variation i fugtig- hed (proverncs vandprocent var ti,6 81,3; middel 21.7). Pe hvcr provc blev mAlt vandaktivitet vctl
hjalp af justerede pracisionshirhygrometrc.
Vandaktiviteten var 0,57-1 ,001 middel 0,82.
Mider og collemboler blev uddrcvet i Berlese- apparat, optalt og en del af dyrenc blev overfort til
Acarina Acarus farhs Acari indet.
Cheyletus erudirus Coccory-deus spp.
L.
t e no gly,
p hus
p I uni ge r
Le
pid
ogl y p l,as
d est uct
or
Mesostigmata spp.
Pygmephorus islandictts Tarsonemus sp.
LIydeas spp.
I Acarina Collembola spp.
24lO 69200
t0 700 20 500 2080 .59.500
220 10400
170 2600
50 1400 t40 4800 1200 16300 5090 -5400
11390 185800
6,10 126(n
+o.4 Rs c/N
-o.5
Ellrotllm !p
Cladoaporlum horbaru m
A a p
a,glllus
Tarsontmu: spl
Mider og svampe i foderhg 25
-o.4 -o.2 o.o +o.2 +O.4 +0.6
Rs water actiYity
Fig. 2. Succcssioncn af mider og svampe i ho ordnet eftcr dc cnkeltc organismers Spearman Rank Correlation (Rs) til CA.i og vandaktivitet. Successionen begynder foroven til venstre og slutter nederst til hojre.
The succession of mites and microfungi in hal arranged from the organisms Spearman Rank Correlation (Rs) with C,Al and u'ater activity.'Ihe succession proceeds from the upper left to the lower right.
Ud fra figuren cr det klart, at miden Lepido- gl1'phus destructor sammen med miden Cheyletus uttditus er successionens pioner-arter, som siden at'loses af de ovrige. En anden, almindelig mide i ho. Acants farris, cr scncre i successionen. Mider- ne Tarsonemus sp. 2, Caloglyphus rhizoglypho- ides og Pygmephorus islandicus er knyttet til ncd- brydningens terminale stadier.
Anden del ( 1983 )
f)e .18 individuelt indsamlede prOver indeholdt
1 1systematiske kategorier af mider og collemboler.
De 9 af dem sas ogsa i hoballe-tversnittet. Det
fremgir afTab. 1, aI de undersOgte prover domi-
ncredes af Tydeu: spp. of Autrus farris. Den mik-
robiclle undersogelse af dc sammc prover (Tab. 2)
26 Thorkil E. Hallas & Suzanne Gravesen Tab. 2- Mikrosvampc i 48 prraver af4 mineder gamnrelt h6. Vist som antal kolonier dyrket fra 100 mg hO af hver prave (7 .5 % Malt-Salt-Agar).
Mikrofungi in 48 samples of 4-months-old hav. Shown as number ofcolonies grown from 100 mg ofhay from each sample (7.5 % Malt-Salt-Agar).
Koncentration (density)
Taxa maxlmum
Absidiasp.
Acremoniumsp.
AspergilhLs carulidus A. niger
A. sydob,ii A. versicolor
C
Iad o
sp or
ium
lt e r b ont n
Emericella nidulans Eurotium sp.
Mucor racentostts Penicillium""
Rhizopus nigricuns
S c
o p
ular i o ps is
bre
vic u Liis AIle kolonier (all colonies)
2,44 0.02 0.67 0.02 2.-31
0.38 0.40 16.56 19,65 3.7'7 3.4t) 0.08
\4 \7 26
I 32 I 100 19
t2 100*
110 28 50 2 100.
145.
'
I eDenkell prove !nr nfltrllet hojcrc. nrefl kunne ikke tallc! r-derliSere Dcrforblivcr middchalcr lidr hoicrc cnd dcr visrc.
In
asingle
sanrplethe nunrher
washigher and not to
befurther counted.
(i)nscquenll!. rhc m!.tr bc(omct rl8hlh hrcher rha shoqn hcr.
'"
P-diatfletiosunt.
P-nvlano.hktunt
ckP. tnidicau
.gav 15 slags svampc. hvoraf Eurotium sp. Emeri- cella nidulans var dc lalrigcst reprasenteredc pe det valgte medium. For hver mide. der blev fun- det, kunne der i gcnncmsnit pivises 48 svampeko- lonier ved dyrkning fra den tilsvarende mangde ho.
Diskussion
C/N og vandaktivitietet var indbyrdes negativt ko- rellerede (Rr: {).21 og Ho: 0,14. Den lave signifi- kans ma ses sammenheng med. at vandaktiviteten er i ligevegt med vandprocenten (R,: +0,93 og H,,:
0,0001). Alligevel er CA{ og vandaktivilct - hvcr for sig - gode udtryk for den samme nedbryd- ningsproces. Vcd hocts ncdbrydning sker der en respiration hvor CO, frigives og C/N bliver mind- re. Den hertil koblede dannelse af H,O fir samti- digt vandaktiviteten til at stige.
Ho, som ikke er nedbrudt. har hojt CA.{ og lav vandaktivitet. Nedbrudt ho har lavt CA.,l og hOj vandaktivitet. Derfor vil en organisme. hvis kon- centration i provcrnc milt mod C/1.{ giver en hOj R, og en lav R. mod vandaktiviteten, vere knyttet til successionens begyndelse. Omvendt vil en lav
R" mod C,D,l og en hoj R, mod vandaktiviteten pla- cere organismens tatteste forekomst i successio-
nen anden ende, det mest nedbrudte hO. Resulta- tet af disse beregninger (Fig. 2) er en successions- model, der viser, at svampene dominerer i starten af hoets nedbrydning og at midcrne og collembo- lerne har deres hojeste koncentrationer langt se- ncrc.
Ved at sammenligne modellen (Fig. 2) med ho- ballesnittet (Fig. 1) ses det, at modellen i store
trak folger det direkte observerede for midernes vcdkommende. Derfor er der grund til at antage, at ogsi svampencs placering i successionsmodel- lcn svarer nogenlundc til dc faktiske forhold. Re- sultatct har umiddclbar mcdicinsk, biologisk og landbrugsteknisk intercssc. men mi i den forbin- delse ikke opfattes sonl en endelig og nojagtig be- skrivelse af h6ets okosystem. snarere som en ar- bejdsmodel. der knytter sig sterkt til den anvend- tc metodik og tJennes fortolkn ingsmassige svag- heder.
Diversiteten af svampeslegter isoleret fra h@et
cr formentlig mindre end den burde vare. Det skyldcs. at vi valgte et dyrkningsmedium. hvor vi undgik overvakst af dc opportunistiskc Mucor og Rhizoptts (supplerendc tlvrkningcr pa V-8-agar vislc
tilst cdevzere lsc al Rhizopu.r ttigrir-arrs i samt- lige prover).
S tltL t
ssi
onens nal urhis
to r
ie
Alle de involverede arter er til stede ihoet nir
ncdbrydningen starter og for si vidt ogse senere.
Arterne er opportunister, der kan foroge deres antal drastisk, nir forholdene passer dem. De ovcrlevsr som hvilcformer. sprcdningsstadier el- ler i sma antal - klar lil at udnvtte de s:rrlige for- hold, der betinger dcrcs bcstemtc plads i succes- sionen. Det cr narliggendc, at antage, at en art frr
sit storste lokale individantal pa grund af handel- ser, der ligger for den i successionen. LESI pA den- ne made lever svampene udelukkende af hoet.
Miderne Ctenoglyphus pluntiger og Lepidoglyp-
hus destructor grrsscr pi svampcnc og miden Cfte-
)'lelus eruditus. som cr prcdator, lcver af disse to
mider. Hertil er billedet klarl nok, men de senere
dyr kan i realiteten velge mellem flere og flere fo-
detilbud, si man ikke kan vide pracist om de ader
svampe. hinanden eller for eksempel bakterier
(som ikke indgir i vores unders6gelse). Midearter
som ,4carus farris og Tyrophugus longior har
nrunddele som Lepidoglltphus og al crtaring tyder
pa. at de ikke kan vere predatorer. Derimod har miderne Tydew spp., Coccotydeus spp. Pygmep- horus islandicus, ogTarsonemus sp. I og 2 stiletter som munddele, hvilket for en umiddelbar betragt- ning tyder pl. at de er rovdyr.
Medicinske aspekter
Ved erhvervsbetinget type l-allergi hos menne- sker. der hindterer hd, er det relevant at tsenke pa sensibilisering over for grrspollen, dyrchir (mus) og skimmclsvampc, men forst og frcmmest lager- midcr. Speciclt bor man teste med de organismer.
der cr talrigcst i begyndclsen afsuccessionen. De- res maksimale koncentrationer (levende eller d0- de, samt stof-\kifterester m. m.) vil vare bedre re- prresenterede i homassen end de organismer, der optrader sent i nedbrydningen. Det vil sige. at man hyppigere eksponeres for de svampe og mi- der. som er tidligt i successionen. Det forhold, at patienter oftere reagerer pi miden Lepidoglyphus dcstructor end pi miden Acarus siro (Cislason 1985, Gislason et al 1985b) kunne vare en konse- kvens af dette - men det er neppe hele forklaring- en.
Tak
Rejseomkostninger i tbrbindclsc mcd fcltarbcjdct
i Island tbr'I'. H. blev dakket af dcn islandskc sundhedsstyrelse. Sigurdur Richter fra Institut for Experimentel Pathologi (Islands Universitet) og
Mider og svampe i foderhP 27 Bjarni Gudmundsson (Islands Landbrugsministe- rium) hjalp med praktisk tilretteleggelse. Carbon/
Nitrogen blev milt af Johannes Gislason (Land- brugsskolen i Hvanneyri) og af lngvar Arnason (Naturvidenskabeligt Institut, Islands Universi- tet). Jens Frisvad fra Instituttet for Biotcknologi (Danmarks Tekniske Hojskole) hjalp os mcd arts- bestemmelsen af Aspergillus og Penicillium.
Litteratul
Cislason, D. 1985. Forradskvalster: Del af epidemiolo- gisk undersrikning av islandske bonder. - Symposi-
um om allergi. Helsingor 1985. ALK Kobenhavn 62- 65. (ln English)
Gislason, f).. Asmundsson, T.. Magnusson. V. & Gra- vesen. S. 1985a. Kiinnun il sambandi hcyvcrkunara- ferda og einkenna af heyryki itveimur landbunadar- herudum d lslandi. - Utdrattur ur erindi fvrir kkna-
thing. Reykravik.
Gislason. D.. Gravesen. S.. Magnusson, V. & As-
mundsson. T. l9U5b. Konnun d tidni bradaofnemis i
tveimur landbunadarherudum ii lslandi. - Utdrattur
ur erindi fyrir leknathing. Reykjavik.
Gravesen, S.. Magnusson, V., Schwartz. B. & Gislason.
D. 1983. Potential allergens ofstored hay in Iceland.
Demonstration by cultivation and immunochemical methods. - J. Agr. Res. lcel. l5: 55-63.
Gudmundsson. B. & Hallas. T. E. 1985. Watcr activit-t-.
moislurc contcnt and conccntration of mites in stor- ed hay in lceland. -J. Agr. Res. Icel. l7:39-44.
Hallas, T. E. 1981. Mites of stored hay in lccland. - J.
Agr. Res. lcel.. 13: 6l-67.
I